guide RNA Produktion
Die erstmals 1990 in einem Einzeller entdeckte guide RNA ist eine Art RNA (Ribonukleinsäure), die als "Wegweiser" für Proteine und Enzyme dient, um die Zielsequenzen zu erreichen und eine Veränderung vorzunehmen. Durch die Bildung von Komplexen zwischen der guide RNA und Enzymen wird die genetische Veränderung einer Ziel-RNA oder -DNA möglich.
BioSpring ist der weltweit führende Experte für die Herstellung und Analyse von guide RNA. Wir begleiten Ihre Programme bis zur klinischen und kommerziellen Reife und bieten Ihnen unübertroffene Qualität und technischen Support, um Ihren Erfolg sicherzustellen. Wir bieten anpassbare Qualitäten, einschließlich in-vivo-Qualität, GLP-Tox-Qualität, GMP-Qualität und mehr. Ganz gleich, ob Sie µgs für präklinische Programme oder große Mengen an Leit-RNA für kommerzielle Anwendungen benötigen, unsere bewährte und skalierbare Produktionsplattform deckt Ihren Bedarf ab. Neben der Herstellung bieten wir die komplette Palette und Anpassung von Freigabetests, die Entwicklung analytischer Methoden und die Validierung von guide RNAs an - von der Frühphase bis zur kommerziellen Anwendung.
Um unsere Führungsposition bei der klinischen und kommerziellen Herstellung von guide RNA zu erhalten, haben wir unsere guide RNA-Kapazität bis 2023 verdreifacht. Für Kunden mit Programmen in fortgeschrittenen Stadien bieten wir Unterstützung bei der Prozessvalidierung und der Marktreife an.
Ex vivo und in vivo guide RNAs für:
- Genome Editing
- Base Editing
- Next Generation Genome Editing
~ 40 - 140 (+)mers*
*längere Sequenzen auf Anfrage erhältlich
Wir bieten Chargen in flüssiger, gefrorener und lyophilisierter Form an. Unsere unsterile Abfüllung für GMP und GLP/Tox wird in einer unsterilen Umgebung der Klasse C (ISO 7/8) durchgeführt. Wir bieten auch die Möglichkeit der Abfüllung mit geringer Endotox- und Bioburdenbelastung. Wir freuen uns darauf, in den kommenden Jahren sterile Abfüll- und Endverarbeitungsdienste für guide RNA einzuführen.Zwei Jahrzehnte Erfahrung in der GMP-RNA-Herstellung
Abfülldienste
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Knowledge Corner
Gene Editing bezeichnet einen Prozess, der das natürliche Reparatursystem für DNA-Stränge nutzt, um spezifische Veränderungen an der DNA vorzunehmen. Die wohl bekannteste Plattform für das Gene Editing ist das Cas9-System, das sgRNA (single guide RNA) verwendet. Dieses System wurde von Emmanuelle Charpentier und Jennifer A. Doudna entwickelt, die 2020 den Nobelpreis für Chemie für ihre Arbeit an der Nachbildung der "genetischen Schere" des CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas-Immunsystems des Bakteriums Streptococcus pyogenes erhielten. Das CRISPR-Cas9-System ist in der Lage, DNA unter Steuerung einer etwa 100 Nukleotide langen sgRNA präzise zu schneiden. Die sgRNA besteht aus zwei Hauptabschnitten: der "Gerüst"-Region, die auch als "direkte Wiederholungsregion" bezeichnet wird und für Struktur sorgt, und der "Spacer"-Region, die spezifisch für die Ziel-DNA-Sequenz ist. Diese Kombination ermöglicht es, einen präzisen schnitt des DNA-Doppelstrangs vorzunehmen.
Eine weitere Anwendung des guide-RNA-vermittelten Editing ist das Base Editing. Beim Base Editing wird ein einzelnes Basenpaar angepeilt und von C-G zu T-A oder A-T zu G-C umgewandelt. Damit das Editing stattfinden kann, rekrutiert die guide RNA das modifizierte Cas9-Protein und das Deaminase-Protein zur Zielsequenz. Das Base Editing ermöglicht eine gezielte Bearbeitung des DNA-Strangs, wobei nur ein DNA-Strang angeschnitten werden muss.
Für das Gene Editing gibt es zahlreiche Anwendungen. Beim Ex-vivo-Gene-Editing werden Zellen eines Patienten entnommen, bearbeitet und dann dem Patienten wieder zugeführt (autologe Zelltherapie) oder in ähnlicher Weise Zellen eines gesunden Spenders verwendet (allogene Zelltherapie). Eine besondere Herausforderung beim Ex-vivo-Gen-Editing besteht darin, dass die bearbeitete Zelle in der Lage sein muss, den Prozess der Entnahme, Manipulation und Transplantation zu überleben und sich möglicherweise zu vermehren, wenn sie dem Körper wieder zugeführt wird.
Im Gegensatz dazu wird das In-vivo-Gen-Editing in Fällen eingesetzt, in denen die Zellen des Patienten nicht entnommen und wieder eingebracht werden können, wie im Falle einiger Krankheiten, die das zentrale Nervensystem und den Bewegungsapparat betreffen. Die Gewährleistung einer sicheren und effizienten Zuführung der wesentlichen Bestandteile für die Bearbeitung des Zielgewebes, ganz zu schweigen von der kontrollierten Zellbearbeitung innerhalb des Patienten, sind potenzielle Einschränkungen beim In-vivo-Gene Editing.
Der Bereich des Gene Editing wird immer vielfältiger und entwickelt sich rasch weiter. CRISPR Car-T-Zellen, die auf krebsartige Leukämie- und Lymphomzellen abzielen, befinden sich in der klinischen Erprobung, ebenso wie CRISPR-basierte Behandlungen der Sichelzellenkrankheit. Das therapeutische Potenzial der guide RNA für die Entwicklung neuartiger Therapien für ein breites Spektrum von Krankheiten ist enorm.
Quellen
Rohner, E., Yang, R., Foo, K.S. et al. Unlocking the promise of mRNA therapeutics. Nat Biotechnol 40, 1586–1600 (2022). https://doi.org/10.1038/s41587-022-01491-z
Foster, J. B., Barrett, D. M., & Karikó, K. The emerging role of in vitro-transcribed mRNA in adoptive T cell immunotherapy. Mol Ther, 27(4), 747-756 (2019). https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2019.01.018
Sahin, U., Karikó, K. & Türeci, Ö. mRNA-based therapeutics — developing a new class of drugs. Nat Rev Drug Discov 13, 759–780 (2014). https://doi.org/10.1038/nrd4278
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